--> '1 . .1 SECTION 2 TECHNICAL PART 2.1 Immunological screening USADA 0027 ( ■ LNDD MODE OP^RATOIRE Codification : M-AN-08 Version : J Date :27/02/2006 1/5 ANALYSES IMMUNOLOGIQUES SUR L'AXSYM Obiet Description du mode operatoire pour la recherche par immunofluorescence des homiones peptidiques LH el p- II concerns touts pereonne impliquee dans les arralyses de depistage rapide et de verification. ^^^FlDEt^TlEi ^P^ciMEiv Documents cites M-E-04 ; M-V-13 ; M-TE-05 ; l-TE-03 ; [-C0NF-06 ; l-LEC-06 ; f-LEC-06B ; E-Remis-06 ; E-Remisconf- 01 ; l-M-11 An cours de Panalyse, rsnseigner renregistrement de suivi des aliquotes : E-TE^2C pour une analyse de screening, E-TE-03G pour une analyse de v^rtfication. APPLICABLE ie 02HAitS2006 Contenu du mode operatoire Toule personne utilisant I'AXSYM doit faire figurer a I'ecran son code op^rateur : ^^^>JHANCE QUALITY - S61ectionner "F6 Niveau d'acc6s" LNDQ ' Saisir son code op6rateur. - S^iectionner "Accepter" Les dosages immunologiques de d4pistage rapide sont effectu^s sur les aliquotes ^hantiltons issus de la mise en tube t-TE-^3. Les dosages immunologiques de v^rincation sont effectu^s sur les aliquotes mis en tube seton hCONF-06. Prealablement 6 toute analyse, s'assurer que la calibration et Ie contr6le joumalisrs de Tappareil ont ete effectuis et validis selon les modes op6ratoires M-E-04 et M-V-1 3, Les aliquotes du d6pistage rapide ne sonl sorlis de la chambre froide a 4°C que lorsque raulomate est pr6t. Si ranalyse ne peut fitre effeduee dans un delai de 5 jours suivant la mise en lube, les aliquotes sont bouches el places a -20-0 ; il seronl decongel4s selon Ie mode operatoire M-TE-05. Ces Stapes de congelation / d6congelation sont consignees dans I'enregislremenl de suivi des aliquotes E-TE-02C. La verification n'est commence© que lorsque I'automate est pr6t. ^1 USADA 0028 LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-AN-08 Version : J Date :27/02/2006 2/5 ANALYSES IMMUNOLOGIOUES STJR L'AXSYM Lancement des dosages Les ^chantillons i analyser ont e(6 prealablement homog§neis6s au vortex, et sont centrifuges 10 minutes a 1370 g (temperature ambiante) avant de proceder a {'analyse. Pourleblanc urinaire et les pr6levements issus de sujets de sexe masculin ou dont on ignore le sexe. les dosages a effectuer sont LH et p hCG ; ces analyses sont s6lectionn6es par le panel M- An08. Sequence a respecter (depistage rapide) - Blanc urinaire - Echantillons - Controle LH de fin de s&quence de t'appareil - Contrfile p hCG de fin de sequence de I'appareil SPECIMEN ^- CONFIDENna 1 S6lectionner "Uste des demandes" 2 Selectionner "F6 Patienr . „ ^. , i »« a no 3 Saisir I'identite "IDE" et un "commentaire" pour le blanc urinaire, puts s6lecttonner le panel M-An08. "IDE" = B!U "Commentaire" = iJmm-n-BIU-j'j'm'm'-n' avec : ijmm = date d'analyse n = num6ro de s6quence de la date d'analyse consid6r6e j'j'm'm' = date de mise en tube n' = numiro de mise en tutte de lajoumee considerde (Ex- ■Commentaire"" 0603-1 -BIU-0503-2 Blanc umare aSquote tore de la dcuxltme mise en tube du 5 mare el analys* lore de la ptcrmtfe sequence duG mare) Notes Sit s'agit dune verification, aputer -vSrif a la suHe au commentaire. De m§me s7/ s'agit d'une contre-expeitise. aputer 'CE' d la suite du commentaire. A S61eclionner "F6 Ajouter" 5 Saisir I'identil6 "IDE" de !'6{*iantillon, puis s6lectionner le panel M-An08. "IDE" = Num6ro de iaboratoire + Numero de I'^chantillon (Ex: 123/12 123456) Ngtss USADA 0029 ^C -N LNDD MODE 0P£RAT0IRE Codification : M-AN-08 Version : J Date :27/02/2006 3/5 ANALYSES IMMUNOLOGIOUES SUR L'AXSYM S-il s'ag/f d-un ^hantillon -Remis'. findiquer par 'R- devant te numiro SchantHlon (Ex . R 123/12 T23456J + lettre diff^rendant chacun ttes aliquotes (a. b.c.d) ,„k„„,„;„ 4. «„™i„ Dem7me siV s'agtt d'une confre-expcrtise, renseigner la partie "commentaire- : num^ro de /aboratare + nt/m^ro 6chanWton + CE + lettre dmrendant chacun des aliquotes (a. b. c, d) 6 S61ectionner "F6 Ajouter" 7 R6p6ter les 6tapes 5 et 6 pour chaque 6chantillon. . 8 Saisir Tidentite "IDE" et un "commentaire" pour te controle LH de fin de sequence de lappareil, puis s^lectionnw te panel CQ-LH. "IDE" = CQ LH "Commentaire" = j)mm-n-CQ LH SPECIMEN avec : ijmm = date d'analyse n = numSro de sequence de la date d'analyse consideree (Ex: •Commentaire* = 0603-1-CQLH Cortrale US 6e finde sfequence tie ToppartMl pour la prern*™ sequence du 6 mars) NQtes S-il s'agit dune v4>rincation. ajouter 'v^riT d la suite du cxtmmentaire. De m6me s'il s'agit d'une contre-expertise, ajouter "CE" d (a suite du commeniaire, comoEmEi 9 Selectionner "F6 Ajouter" . . 10 Saisir l'identit6 "IDE" et un "commentair«" pour te contr6te p hCG de fin de sequence de t appareil, puis selectionner te panel CQ-HCG. "IDE" = CQ HCG "Cmnmentaire" = jjmm-n-CQ hCG avec : iJmm = date d'analyse n = num6ro de sequence de la date d'analyse consider^e (Ex: ■Commentare" = 060Vl-CQt»CG . ^ e , Cwitr«e hCG de tin <»e sequence de fapparel pow la promttre sftquence du 6 mare) NQtes S'il s'agit dune verification, ajouter -viriT is la suite du commentaire. De m&me stl s'agit d'une contre^pertise, ajouter 'CE- A la suite du commentaire. 11 Selectionner "F6 Ajouter" 12 Selectionner "F1 Sortir" pour revenir d I'fcran "lisle des demandes" ^ „ . . 13 Imprimer la liste des demandes et i'archiver A la date du jour dans le classeur C-MA-Axsym Echantillons. - Sortir les portoirs designes par I'appareil du carrousel echantillons. Distribuer dans les cuves echantillons, plac6es sor les portoirs selon la liste des demarxles : USADA 0030 ^^S^ Codification : M-AN-08 Version : J Date :27/02/2006 4/5 ANALYSES IMTtfTINOLOGlQlI ES SUR L'AXSYM Pour le blanc urinaire et !es fehantilLons : 300 mL minimum de chaque urine, k ia microi>ipette ou niveau "bas" du controle p bCG (r6f interne : AXR06-AB). E. :. B04 : 123/12 123456 >. C^e .*.r««,n-4 ; poru* B, 4ch,,«o. 123456 de nu,n*ro ■*« >a^ Replacer le portolr sur son carrousel. - S'assurer que I'appareil dispose de suffisamment de cartouches de reac^on pour effectuer tes analyses demand6es. Sinon, en ajouler. - Lancer I'analyse au moyen de la touche verte "Lancer" . Placer les lubes contenant le reste d'urine et les contr6les i +4'C. SPECIMEN M^. cnnt t«»rTnin6*>s TAXSYM imprlme automatiquement un rapport de resultats rC'elSSorir-rdl^^Ssr„L «'^lo„s de ,«ur. .-LEC^ (d.pi=.ag, rap*, OU 1-LEC-06B (verification). Lorsque ^automate refuse .de ^^"f^^,^;^^^^^ ^^ ..^^^^ ^^,3 3oit in^prime. - Analyse p hCG . dilution avec le Specimen Diluent Dil-AB. Si un r6sultat est obtenu, ne pas oublier de le multiplier par 2. Si I'analyse est de nouveau impossible, imprimer I exception. A Tissue des analyses : - Jeler les oodets 6chanti!lons dans un container jaune. - Effectuer les maintenances nfeessaires selon 1 mstniction l-M-n. COHFlBEHmi USADA0031 ^^ LNDD MODE OPERATOmE Codification : M-AN-08 Version : J Date :27/02/2006 5/5 ANALYSES IMMUNOLOGIQUES SVR L'AXSYM ActioD Persoone cooceni^ Date redigepar Nathalie CREPIN 15/02/2006 verifie par Francoise LASNE 17/02/2006 verifie par approuve par Aurelie LAURENT 27/02/2006 Jacques DE CEAURRIZ 27/02/2006 EVOLUTIONS N° Version Motif Date H - Modification du paragraphe concemant les analyses non rendues par I'automate. 07/01/2005 I - Preciser que le lancement de I'analyse se fait dans la foulee de la centri, - Lors d'une verif, preciser "verif ' devant le numero d'echantillon 03/02/2006 J n existe un mode op de decongelation des aliquos, mais il n'6tati ecrit nulle part a quel moment il etait necessaire de les congeler. 27/02/2006 SPECIMEN CONFiDENTIEL USADA 0032 c^K LNDD ENRE-GISTREMENT ;Codiricaiion: E-TE-O-C ■ Version : H iDats: 10/12.2004 !'l DEPISTAGE RAPtDE BIMUNOLOGIE : FICHE DE SUIM DES ALIQUOTES U^xsoperatojre Lfrt talibrateufs LH Loltonlroles LH L«-t(6aclifsLH Sims Rerris M-An-OB Version ''151 3£Ct3QMJD '^^Z^JOD ko€E2QJco Lot calibrateurs p-hCG Lol confrofes p-hCG Lot reactifs p-hCG '^h^QJco as 3@oa_Jr) 2&&^ SiJJXi 1 Jii/oi JWo4 1_ Mu ise en tube ; date et n' \0.O^.(X_(^ | ^"^^ ""^""^ ''""^^ |^0<^ ^. &£uL- ygU?J. -i^ .. Congdialion 6venluelle D6cong61ation Prise ise en charge de la ^i _ ^ ^ mise en tube i^UA Oo Vortex et centrifugalion LancemenI de ['analyse, stockage des lubes k 4°C Destrvclhn des tubes ^o'O £LO^a Jo MO £iDio& llMd. Ao''£o M 'CO Cenlri. §* Sairs objet Reffig. (*> ow CH-FR. Sa/?s oiye/ :ia. nm^ j3^ XP-^ Remarques t 'original de cet enreglsirement est i conseiver dans h classeur C-Fiches suivNmm, une cople est fournkavec le dossier de la serie. USADA 0033 ^5 TABORATOIRE NATIONAL DE DEPISTAGE DU DOPAGE LAB0RA1U1K^_^ avenue ROGER SALENGRO 92290 CHATENAY MALABRY IDENTIFICATION APPAREIL: AXSYM RAPPORT ECHANTILLON .IDE: 178/07 995474 IDP: Norn: Date: 21/07/06 DOSAGE RE SULTATS UNITES INTERPRETATION DILUTION^ LIMITES BhCG 21/07/06 10:59 LH 1 .45 lU/L 1.09 lU/L 21/07/06 11:09 UNDILUTED 0.00 - 12.00 UND ILUTED 0.00 - 40.00 "N Date -M^Ok Opirateur iiX... ~ —•■- Resullau : ^Dans Ics Bormes a A virifier Remarques ;~ ^ IIIIKtHHif TfrV •<>*■*•**•••■••■«*• "•■H>t*«v***tHttl*fll4> USADA 0034 30 I I I ! SECTION 2 TECHNICAL PART 2.2 Natural hormone screening USADA 0035 LNDD ENREGISTREMENT (LISTE) Codification ; L-SCREEMNG Date : 31/03/2006 1/1 SPECIMEN LISTEDES ESSAIS DE DEPISTAGE RAPIDE ASSURANCEQ^ QUAUTt CODEde I'Etnl ES02 UATIUCE Urine ES02C ESD3 ABREGEdeto fudUe rcchn-cbfe mrrniLE dc VEtUi MODE OPERATOntE DE PREFARATIOK BBS Urine EPH Recherche par CG/SM de molecules basiques extractibles par SPE 6ohangcuse de cations- Mdfaode de semi-quantification de la Morphine .Recherche ct semi-guanafication des ^ph^drines Urine ES03B ES03C ES04 Urine Urine CD LCH LCHQ MODE OPERATOIRE D'ANALYSE M-EX-02 M-AN-04 M-EX-02 I M-AN-02C Recherche par CLHP/UV/SM de diurttiques et ,^,ex-03G M-AN-32 cofticostfaoMes Recherche ^ CLHP/SM ^JHtiit^ M-EX-03D I M-AN-31 d'anabolisants Recherche ysr CLHP/SM d'anabolisants ES05 Urine Urine ES06 ES07 Urine AN ABO (ouH) M-EX-03P I M-AN-31B Recherche CG/SM de molecules i effct anabolisant et autres molecules extractibles par SPE apolaire avcc semi -quantification des stiroMes cndogenes et des molecules k seuil de positivit^ AN ABO (ouMS2) IMM(ou Immunologic) Recherche CG/SM/SM dc molecules i effet anabolisant M-EX;-04 M-AN-06B Dosage pai immunofluorescence des hormones ,peptidiques LH ct P-hCG Urine ES08 ES08B Urine Urine EPO HESouHEA PS Analyse par focalisation et double iromunoblottrnf- d' isoforroe s des erv&ropoi^tines M-EX-04 M-AN-07B M-AN-08 M-AN-08 M-EX-25 M-AN-43 Recherche delTiydroxv6thylamidon par CG/SM [ M-EX-22 MAN35Sc Recbercfaede polysaccharides par colorimfeie | M-EX-50 1 M-AN-55 \ ESSOl ESS02 Sang Sang HBOCs Recherche d' Hemoglobin-Based Oxygen Carriers par ileclropborese Transfusion sanguine (TS) Recherche des transfuaons sanguines bomologucs j par cytometric en flux , N.B: Les codes des essais sont inscrits en gras lorsqu'ils sont dans la portfc d'accre<^tation vaUde i^..-.... .....-■....^....v^..^5^^^^^^^iMifiaeti3S^^ Motif - Lc mode op6ratoire de preparation dans l-ESOS a changi ce n'est plus lc M-EX-03B mais le M-EX-03G Cf. E-INFO n-56. - Dans l-ESSOl le mode op6ratoire d'analyse n'est plus le M-AN-53. -Ajoutdel-ESOSB. - Ajout de l'ES02B. - StippressioD de I'essai ESIO (Mfeocaiti par GC/MS) . Modification de l'ES02B en ES02C Date Effusion 16/03/2006 Modification du Mode Op6ratoire d'analyse de I-ESCM (M-AN-06B au lieu de M-AN-06). ^ 17/03/2006 31/03/2006 USADA 0036 3^ LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX-04 Version : D Dale :03/l 1/2005 1/3 METHODE DE PREPARATION PES ALIQUOTES - DEPISTAGE RAPIDE ANABO Documents utilisis: M-P-03B. I-N-25, 1-M-01, 1-tRAC-Ol. Remplir Venregistrement E-TE-02J Cj? V ,#^ OPERATIONS Prise d'essai = 2 mL H MATERIEL Tubes 16x100 Pqwtle 1-5 mL, c6nes dc 5 mL RtACTIFS ET PRODUITS Ajouter 100 nL de SIm02 Pipette Eppendorf i dSplacemcnt positif Solution de nounethyltestostirone ARJter au vortex Combitips Vortex Ajiistcr & pH = 7 en agitant au vortex Papier pH 0-14 n Ajouter ImL de tampon pH=6. 5 Aeiter au vortex Ajouter une Routte de p-giu Agiter au vortex Boucher les tubes 3 Hvdrolvscr Ih a 55°C Vortex Dispensette Vortex Flacon con^te goutte Vortex Bouchoos Etuvc Laisser re&oidir k temperature ambiante + Androstirone D4-glucuronide + salbuD3(CH-FR.l) Flacons conptc gouttes K2C03, CH3COOH Solution tampon pH 6.5 (CH-FR.I) p-glu: p-glucuronidase (CH-FR-1) comoEmEL ASSURANCE QUAUTt LNDD Ajouter 1 00 iiL de tampon pH= 1 1 Pipette Eppendorf h dSplacement positif Solution lan^n pH 1 1 Combitips Agiter au vortex Ajuster d pH = 9 en agitant au vortex D Ccntrifiigei 5 min Tiansvaser Ic sumageant Vortex Papier pH 7-14 Vortex Centrifiigueuse i 4000 tr/imn Tubes & hdmolyse 12,5x100 Flacons con^te gouttes K2C03, CH3CO0H APPLICABLE le X (I3HOV.2005 Extraire par SPE scion la mfithode ANABO Cf I-N-25 cl I-M-01 Gilson ASPEC XL4 Cartouches Bond Elut C18, 200nig/3mL Bouchons d'itancbiili Tubes^hdraolysc 12,5x75 US AD A 0037 3t3. LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX-04 Version ; D Date :03/ll/2005 2/3 MF.THODE BE PREP^« ATION PES ALI QT IO T ES - PEP ISTAGE RAPIDE ANABO SI L' APPAREIL N'EST PAS PRET: BOUCHER ET STOCKER LES TUBES A+4''C (temps de conservatio n max i 3 lours) Evaporer jusqu'4 s^chagc complct (de 20 a 30 roin) BouchoQs pour tubes i, himolyse 12,5x75 CH-FR-1 Bm i sec i 60 "C + Soufflettes Azote Sous la hotte el k temperature ambiante Ajouter 50 \i.t dc rfatctif H et boucher les tubes Agiter au vortex Dfiriver 20 inin 4 60°C IZl g^^ g Solution de r^actif H (CH-FR.I) Bouchons pour tubes fthdmolyse 12,5x75 CfM-P-03B Vortex Conditionner en vials prialablemenl identifies selon I-TRAC-01 En prilevant d'abord ~ 2 1 jiL pour U MS2 puis ~ 20 nL pour les H Bain £k sec Tubes fennis Vial polypropylene h insert 200 nL Capsule a sertir SI L'APPAREIL N'EST PAS PRET: CONSERVER LES VIALS A TEMPERATURE AMBIANTE (temps de conservation max: 24 h) <0 ,c#^ cor lOEHTlEL USADA 0038 33 LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX-04 Version : D Date :03/l 1/2005 3/3 METHODE DE PREPARATION PES ALIQUOTES - PEPISTAGE RAPIDE ANABO H^iS^Wpi^S^^I§^^^i^KI@ ii rfi'iiiliwIi'iHiiliiiiiiiiMMiii 1 |ii'lif(ll'i fiiiiiiJiiiiiii'i'miiiiiiBiill redig^par Marjorie CARIOU 02/U/2005 virifi^par Nathalie MECHIN 02/11/2005 J^^S*^ verifiepai Aurilie LAURENT 03/11/2005 "^t If riff//' / approuve par Jacques DE CEAtJRRIZ 03/11/2005 X llM^ / / jK^ I N" Version Motif Date B rassemblement de M-EX-04, M-EX-04F, G et H, ne plus mettre dans le titre le critire "hydrolyse" .Ajouter ce critere ainsi que celui du reactif utilise dans le contenu du doc. 17/03/2003 - Ajout d^me 6tape pour la preparatioa des echaatiUons lorsqu'ils doivent 6tre repr6pares pour Salbulamol>500ng/nil - Pr6cision sur rhomog^neisation de rechantillon (vortex) (E-INFO du 17/03/04) - Ajout de I'etape de rcmplissage de la fiche de preparation E-TE-02J (action 7, audit 26) - L'Svaporation des phases organiques se fait maintenant sous azote (E- INFOdu 10/05/04) - Mode operatoire concemant uniquement les echantillons et non plus le recal et mix (creation de M-EXMDC-04). 03/12/2004 D Note d'infoimation N°38: si salbutamol >500ng/niL, ne plus remettre rechantillon. R^ajustement du temps de s6chage : 20 ^ 30 min (sechage plus rapide avec I'azote qu'avec I'air). Precision d'une 6tape : vortexer les tubes apres ajout du r^ctif H. 03/11/2005 SPECME^ USADA 0039 2h ■> LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EXMIX-04 Version : B Date :03/n/2O05 1/2 ^T»nnF. BE PREPARATION DU RECAL E T DTI MTX - DEPISTAGE RAPIDE ANABO Documena utUts&: J-N-25. 1-M-Bl. M-P-03B. I-TRAC-01. RempUr Venregistrement E-PMIX-04 OPERATIONS MATERIEL RECAL H 1 M1XMS2 Prise d'essai = 3 mL de tampon pH 6^ Prise d'essai = 2 niL de bUnc urinaire + 1 KiL de tampon pH 6i5 Tubes 16x100 Pipette] -5 1^ C6nes ~ y^ •\# Ajouter 50 jiL de RecalH Ajouter 50 jiL de Mix MS2 Ajouter 100 nL de THC-M A pter an voitex Ajouter 100 jiL de SIm02 Seringues de 50 jiL Seringues de 50 jiL Vortex Pipette Eppendorf & d^placement positifctconibitips A piter au voitex I Vortex AjouterlOO^Lde tampon pH=li I Pipette Eppcn_dorfad6placemeE.t I positii A pter au vortex positif ct combitips Vortex Ajuster 4 pH = 9 en ^tant au vortex ~1 Papier pH7-14 1 Voitex CONFIDBfflEL RfeACrn^ ET PRODtJlTS Blanc urinaire < 5 jours (CH-FR.1) Solution tan^n pH 6,5 (CH-FR.1) Solution de RecalH (CH-FR.1) Solution de mix MS2 (CH-FR.1) Solution de THC-M: STUP 32 (CH-FR.1) Solution dc 17am6fliyltestost6rcme + Androstirone D4-glucuionide + salbuD3(CH-FR,l) Solution tanqwn pH 1 1 Flacons con^jte gouttes K2C03, CH3COOH CentrifuRcr 5 min Tiansvaser le sumaBcanl Extraire par SPE seloc la mithode ANABO CfI-N-25etI-M-01 Evaporer jusqu'S s&hage complet (de 20 a 30 min) . Centrifiigueuse ^ 4000 tr/min Tubes & bimolyse 12,5x100 Gilson ASPEC XL4, cartouches Bond Elut CI8, 200mg/3mL, bouchons d'itancliiiti , tubes & himolysc 12,5x75 Bain S sec a 60 °C + Soufilettes Azote !J RANGE QUALITE LNDD Sous U hotte et a temperature ambiante Ajouter 50 nL de rtactif H et bouciier les tubes Seringue Bouchons pour tubes 12,5x75 Solution de rfactifHCfM-P-03B (CH-FR.1) Apter au vortex ^ Vortex D6river20min460°C : Conditionner en vials prialablement identifiis selon I-TRAC-01 Bain a sec Tubes fennis Vial polypropylene i insert 200 nL C^sule a serttr Pipette, c6nes 200 jiL APPLICABLE le 3 NOV. 2005 USADA 0040 3S LNDD MODE OPiRATOIRE Codification : M-EXIvnX-04 Version : B Date ;03/ll/2005 2/2 METHODEDE PP^PA B ATTON PU RECAT FT P" -"" - »i^"«T^aF. RAPIDE ANABO A. B Creation du document. R iajustement du temp s de sechage : 20 a 30 min (sectoge a Vazote plus ranideau'avec del'air). , ,.■ t Scision d'une etape : vortexer les echantiUons apres avoir ajoute le 03/11/2005 reactifH. SPECIM Ot/^ria "^ USADA 0041 LNDD ENREGISTREMENT Codification: E-INFO Veraon : C Date: 09/07/2004 1/1 COMPLEMENT TRANSITOIRE D'UN DOCUMENT QUAUTE Cet enregistrement n'est A utiHser que si la modmcation est URGENTE et majeure et/ou cons^quente et/ou applicable i plusieurs documents nm-fe d'ap pUcation •^•' '? mnrlifir^tion: □ TEMPORAIRE, date de debut d'application: date de fm d'appUcation: (J^ DEFINITIVE (modification a apporter dans la prochaine version du(des)doc.concenie(s)) date de debut d'appIication:.^.(a./.'TVO 'Mr^f^ifirJ^ tinn apportee: W cklxx &t vIlriatioD de cet eni^i^trement oa r i' Awrance Oualite ftampon) L 'original de cet enregistrement est £i archiver vivant cm DipartemerU Assurance QualUi USADA 0042 ^ LNDD ENREGISTREMENT j Codification : E-TE-02J Version: B Date: 18/07/2006 1/1 DEPISTAGERAPIDE ANABO . FICHE DE sum DES ALIQtJOTES Mode op^ratoire d'extracdon ; M-EX-04 Date etn=de la mise entire'. [^4 iQ-^tC ^-^ CO', densM et pH du BLU** : Version: |_ D 1 Code du CQ H: oia^ U5 "dTTiooS- t il-^ CQdeduCQMS2: o-o^ S- n" Sdries ou Echantilloas : r.Hg-wrf. «/ w..^^^.'"-. "' = -'"■-'^- '^ ^""""S^if/^'r USADA 0043 .^^ LMDD ENREGISTREMENT Codification: E-PMIX-04 Version : C Date: 18/07/2006 1/1 DEPISTAGE RAPIDE ANABO - FICHE DE SUIVI DU MIX ET RECAL Mode opfiratoire de pr^paradon : M-EXMIX-04 Veision : B Prtparation n : Code du RECAL H: ^ oIP^ Code du MIX MS2: J o^¥FIS CO*, density, pH du BLU'* : Code du THC-M : Code dutan^JonpH 6,5 : As ^pHli 5TU^J^-o-^^-'»'^ -TO<^oQo(> ^ A^ • CO : Code Opirateur ♦* BLU : Blmc Urinaire **• DLU : Date Limits dlJtilisatioii L'original de cet enregistrement est a archives dans le classeur C PMDC USADA 0044 3-^ INSTRUMENT CONTROL PARAMETERS: GC MSD C:\MSDCHEM\1\METHODS\MAN06B__B.M ■ontrol Information [ Sample Inlet Injection Source Injection Location Use MS GC GC/ALS ALS Yes 6890 GC METHOD 170 'C (On) 0.00 min .-EN Initial temp: Initial time: ■■ Ramps: I Rate Final temp Final time 1 3.00 230 0.00 2 30.00 300 4 -ST 3 O.OlOff) V' Post temp: ' C Post time: 0.00 min ■ Run time: 27.00 min .'SONT INLET (SPLIT/SPLITLESS) Mode: Split initial temp: 280 'C (On) Pressure: 170.0 kPa (On) Split ratio: 10:1 Split flow: 13.2 mL/min Total flow: 17.8 mL/min ■ Gas saver: Off Gas type: Helium ■ "LUMN 1 Capillary Column Model Number: Agilent 19091Z-008 Max temperature: 325 'C Nominal length: 17.0 m '. Nominal diameter: 200.00 urn Nominal film thickness: 0.11 urn Mode: constant pressure Pressure: 170.0 kPa Nominal initial flow: 1.3 mL/min Average velocity: 59 cm/sec Inlet: Front Inlet Outlet: MSD Outlet pressure: vacuum ■.-ONT DETECTOR (NO DET) ■ "GNAL 1 -'■: Data rate: 20 Hz Type: test plot Save Data: Off Zero: 0.0 (Off) Range : Fast Pealcs: Off - Attenuation: )LUMN COMP 1 [No Detectors Installed) Maximum temp: 325 'C. Equilibration time: 0.50 min BACK INLET (UNKNOWN) COLUMN 2 (not installed) BACK DETECTOR (NO DET) SIGNAL 2 Data rate: 20 Hz Type: test plot Save Data: Off Zero: 0.0 (Off) Range: Fast Peaks: Off Attenuation: COLUMN COMP 2 (No Detectors Installed) lERMAL AUX 2 Use: MSD Transfer Line Heater USADA 0045 Uo Description: initial temp: 300 'C (On) initial time: 0.00 min I Bate Final temp Final time 1 O.O(Off) POST RUN Post Time: O.OO min LME TABLE Time Specifier Parameter S Setpoint GC Injector Front Injector: Sample Washes Sample Pumps Injection Volume Syringe Size Prelnj Solvent A Washes prelnj Solvent B Washes Posfclnj Solvent A Washes Postlnj Solvent B Washes Viscosity Delay Plunger Speed Prelnjection Dwell Postlnjection Dwell 3 2.00 microliters 10.0 microliters 3 3 3 3 seconds Fast 0.00 minutes 0.00 minutes Back Injector: ■ , parameters specified :olumn 1 Inventory Number -olumn 2 Inventory Number aneral Information hp MS ACQUISITION PARAMETERS jne File -quistion Mode atune.u Scan/SIM ; Information .Ivent Delay : 3.00 min .1 Absolute : False : 200 : 1961. "7 ■■1 Offset -suiting EM Voltage taw Scan Parameters] ow Mass .■'igh Mass Treshold ample # ""Sim Parameters] 50.0 800.0 150 1 A/D Samples ■lOUP 1 oup ID -solution -ot 1 Ion ns/Dwell In Group 1 Low 86.00 ( Mass, ( 71.00, (178.10, (294.20, (318.30, Dwell) I Mass, 10) ( 86.00, 10) (223.20, 10) (295.20, 10) [356.30, Dwell) ( Mass, Dwell) 10) (100.10, 10) 10) (266.20, 10) 10) (333.30, 10) 10) (369.30, 10) USADA 0046 H (371.30, (392.30, (441.40, 10) 1372.30, 10) (426.40, 10) 10) 1377.30, 10) 10) (440.40, 10) ROUP 2 roup ID ^soluti on roup Start Time lot 1 Ion ■ons/Dwell In Group : 2 : Low : 4.00 : 86.00 ( Mass, ( B6.00, (300.30, (34B.30, (372.30, Dwell) 10) 10) 10) 10) ( Ma s s , (178.10, (333.30, (369.30, (440.40, Dwell) ( Mass, Dwell) 10} (266.20, 10) 10) (335.30, 10) 10) (371.30, 10) 10) (441.40, 10) lOUP 3 ■■■■oup ID "■■ solution ■".■oup Start Time - ■ ot 1 Ion 5ns/Dwell In Group ; 3 : Low : 5.0 : 86. ( Ma ( 72. (104. (200. (234. (276. (300. (335. (417 . (491. 00 SE, 00, 10, 20, 20, 20, 30, 30, 40, 40, Dwell) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) ( Mass, ( B6.00, (175.10, (209.20, (266.20, (291.20, (308.30, (361.30, (432.40, (505.50, Dwell) 101 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) ( Mass, Dwell) ( 98.00, 10) (190.10, 10) (217.20, 10} (275.20, 10) (293.20, 10) (309.30, 10) (410.40, 10) (433.40, 10) (520.50, 10) ;-*OUP 4 '■roup ID ■ ^solution ■ :oup Start Time ''"'Ot 1 Ion .r '-ns/Dwell In Group ; 4 ; Low ; 10. : 86. ( Ma ( 56. (235. (362. (420. (436. (505. 00 00 ss, 00, 20, 30, 40, 40, 50, Dwell) ( Mass, 10) (143.10, 10) 10) 10) 10) 10) (272.20, (405.40, (422.40, (448.40, (520.50, Dwell) 10) 10) 10) 10) 10) 10) ( Mass, Dwell) (194.10, 10) (358,30, 10) (417.40, 10) (432.40, 10) (491.40, 10) ■:.(OUP 5 ■coup ID ■.-^solution ■■coup Start Time ■ lot 1 Ion "ans/Dwell In Group : 5 : Low : 11. : 169 ( Ma (159. (275. (341. (419. (431. (434. (448. 50 .10 ss, 10, 20, 30, 40, 40, 40, 40, Dwell) 10) 10) 10) 10) 10} 10) 10) ( Mass, (225.20, (315.30, (405.40, (420.40, (432.40, (438.40, Dwell) 10) 10) 10) 10) 10) 10) ( Mass, Dwell) (241.20, 10) (329.30, 10) (417.40, 10) (422.40, 10) (433.40, 10) (446.40, 10) , "■;-.oup 6 ■ -oup ID ■'Solution , :roup Start Time ''.■-ot 1 Ion ins/Dwell In Group 6 Low 13.00 91.00 Mass, 91.00, 194.10, 225.20, 275.20, 326.30, 343.30, 393.30, 417.40, Dwell) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) ( Mass, [144.10, (209.20, (241.20, (310.30, (329.30, (345.30, (395.30, (419.40, Dwell) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) { Mass, Dwell) (169.10, 10} (220.20, 10) (270.20, 10) (315.30, 10) (341.30, 10) (353.30, 10) (405.40, 10) (431.40, 10) USADA 0047 A& (432M0, (435.40, (448.40, 10) (433.40, 10) (443.40, 10) (482.40, 10) (434.40, 10) (446. 40, 10) (485.40, 1^1 10) 10) ->.OUP 1 ^ -oup ID ■•■■sol^ition ^voup Start Time ■ ■■"■bt 1 Ion '■ ms/Dwell In Group : 1 : Low : 14.00 : 130.10 ( Mass, (129.10, (206.20, (220.20, (2'70.20, (322.30, (341.30, (353.30, (412.40, (417.40, (431.40, (434.40, (443.40, (446.40, Dwell) ( Mass, ID) (130.10, 10) (208.20, 10) (221.20, 10} (275.20, 10) (326.30, 10) (343.30, 10) (350.30, 10) [413.40, 10) [428.40, 10) (432.40, 10) (435.40, 10) (444.40, 10) [452.40, Dwell) ( Mass, 10) (194.10, 10) (209.20, 10) (234.20, 10) (307.30, 10) (339.30, 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) (345.30, (366.30, (415.40, (430.40, [433.40, [437.70, (446.40, (485.40, Dwe 11) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10) 10] 10) 10) 10) ■,MUGAIN r?]MUOFFSET ■"■ -■ILAMENT ■ /DCPOLABITY ZNTLENSOFFS .lASSGAIN '4ASS0FFSET 34.610 69.922 34.814 90.157 9.500 1764.706 1829.000 136.000 2.000 0.000 17.318 -179.000 -12.000 END OF TUNE PARAMETERS END OF INSTRUMENT CONTROL PARAMETERS USADA 0050 4 C:VMSD1 8UUILLET06\21 07\21 bluOl .D Data File Path Cr\MSDl8UUlLLETO6\2i07\ Data File Name 21biu01.D Operator m37p35 Acq. Method File MAN06B_B.M Sample Name 2107 blu 2107 HI Wise Info Vial Number 3 Instrument Name GC MSD Calibration Title Calibration des stiroides endogenes Last Caiibralion Update Fri Jul 21 13:26:58 2006 Fichier recal utilise 21rcl03.D Date:,-2aJ^. Operateur ; ....ijQ... C[) R6sultats : Remarques : 1(X.„.. HC[3 Negatif A verifier # 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9) 10) 11) 12) 13) 14) 15) 16) 17) 18) 19) 20) PsakType Ret Time Signal *ISTD 17.00 301.3 12.14 438.4 4.13 372.3 12.20 434,4 12.42 434.4 0.00 241,2 12.77 241.2 0.00 117,1 0.00 434.4 13.65 432.4 14.22 432.4 15.10 432.4 0,00 371.3 0.00 369.3 15.83 522.5 21.29 548.5 22.04 636,6 0.00 632,6 14,58 343.3 10.15 432.4 Name Methyltestosterone Andro -D4 glue Salbutamol -D3 Androsterone Etiochoianolone 5a3a diol 5b3a diol Pregnanediol DHT DHEA Epitestosterone Testosterone THC-M Salbutamol 11 bOH Etiocholanolone THS THF Cortisol 1 1 Ketoetiocliolanonlone 3a-5C Target Response 1,788,970 453,060 1,030,764 3,875,172 2,128,068 67,799 50,289 115,169 118,839 223,951 181.600 4,385.482 205,105 1.445 Ad4qlu/Si'100 T/ET Testosterone Epitestosterone Androsterone Etioctiolanolone DHEA [Surface] 25.3 1.0 [concentration] 8,5 9.2 DHT Andro / Etio 5a3a / 5b3a diot THC -M 5alb/SalbD3'100 Cortisol / THS THF y THS llbOHetlo/THS THF St/3a5c 1.8 0.0 710 381 10 / 1237,8 0,0 -45.0 0.0 25.8 3.1 355 Amount 200 798 194 710 381 23 10 9 8 -45 43 14 355 49 Units ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml ng/ml Valeurs conventionnelles de relet <19.1 Rapport Concentration Concentration >4 >Z00 >200 Concentration Concentration Concentration > 10000 > 1OO00 >200 Concentration Rapport Rapport >20 >3 >2 Concentration Concentration >15 >75 Pour info (R&D) US ADA 0051 l^ File: C:\MSD18\JUILLET06\2107\21blu01.D\iia Operator: m37p35 Date Acquired: 21 Jul 06 3:36 pro InscruihenC: GC HSD Method File; MAN06B_B.M Sample Name: 2107 blu 2107 HI Hisc Info: Vial Number : 3 Andro -D4 glue Methyltestosterone ^Ltr dance 300000 200000 100000 TiC; 21blu01.D\dalasim.ms '.■ *\ Abundanwlon 438.40 (438.10 to Abundance on 301.30 pOI.OO to i_... nme-!> 5.00 10.00 8000 6000 4000 2000 12J isloo 2o!oO 25.00 Tlme-> 11.50 12.00 40000 30000 20000 10000 16.094 ->£. Time-> 16.00 17.00 ^=iH„f;,mf,l D3 Cortisol D4 findro-Etio di TMS Andro-Etio mono TMS Wal:n372,.30 (372.00 Llar^, en 636.60 ,636.30 Abundan«,on 4^.40 (434.10 Abunda^ - f,-|g [g^;^ 4.} 30 40000 30000 200O0 10000 ,"ime-> 4.00 4.50 Time-> 22.5Q 800O0 60000 40000 20000 1 23^37 Time-> 12.00 H 12.423 II w 600 600 400 200 w 12^67 Time-> 10.00 11.30 ".a3a-5b3a Diol , ~ur-i m ,i 5b < Crait : IRMS EpitesCostSrone - TescostSrone THC M ■ bundancelon 241.20 (240,90 Abundanoa.lon 432.40 (432.10 U. 433.10): 2lblu0 oyatasim.m. Abundancelon 37 .30 (371.00 1500 1000 500 01- :"ime-> 12.30 12.P67 4000 2000 2OO0 1000 'l3!l7 r.me-> 14;oo"'l4Sl4!4014!60 14.80 15.00 15.20 15.40 r.nie-> 17.00 THF THS 11 BOH A/E „.^f,n ti ^^^,.=ir,n KAR fjM^iAR 70 Abundancs 15JB52 17.86 «L°iL 632,60 (632.30 ^'Jndance Ion 636.60 (636.30 ;bundar^ on 546.50 [548.20 Abundance on^g^SO (522.20 J...}\. Aa^ 6000 4000 2000 30000 20000 10000 15.833 "ime-> 22.50 23.37 Tinie-> 21.50 22.37 Tlr(»-> 21 .00 Page l/lS 21.86 TimB-> 15.30 16.17 USADA 0052 Pile- C:\MSD18\JUILLETO6\21O7\21blu01.D\da Operator: m37p35 Date Acquired: 21 Jul 06 3:36 pm . Instrument: GC MSD Method File: MRNOSB^B.M sample Name: 2107 blu 2107 HI Misc Info: Vial Number : 3 „jj„i ■,^j DHER Pregnanediol .bur,dancelon«4,40{434,10 Abundance on432.40 («Z,10 Abundance on117.^10(l16.80 4C0[ I 300l ZOOt'vJ 100 ^ ■■ Vi Oi Time-> 14.00 llKetoetiocholanolone Abundance Ion 343.30 (343.00 4000 3000 2000 1000 14. u:86 Time- 1340 14:i0 T.me->1700 17:86 Ttme-> 14.00 5b Androstandione 4 Androetenedione Inhib derivation 14.86 \bundancelon 432,40 (432.10 Abund^l on 430.40 (430, Abundance on 361.30 (361.00 30OO 3a-5 Cyclo Abundancelon 432,40 (432,10 2000 1000 ..J^~M 600 400 200 400 200 600 400 200 /^J rirnB~> 10.30 11,60 Time-> 14,00 15.30 Time-> 5.50 6,00 Time-> 9,00 Page 2/16 USADA 0053 C:\US D1 StJuilletaSV2107\21 hDS.D Data File Path C:\MSDlB\jullletO6\2107\ Data File Name 21h08.D Operator m37p35 Acq. Method File MAN06B_B.M Sample Name 178/07 995474 H Misc Info Viai Number 11 Instrument Name GC MSD Calibration Title Calibration des stiroides endogfines Last Calibration Update Fri Jul 21 13:26:58 2006 Fichier recal utilise 21rcl03.D Date:..22.t(Xtr. Op6rateur : C[ ] R6sultats : Renjauiiies :i J_nh\.bv.; r^: HC[] N^gatif A verifier T :i.C\e.. [] # 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7} 8} 9) 10) 11) 12) 13) 14) 15) 16) 17) 18) 19) 20) Peak Type Ret Time Signal Name Target Response Amount Units •ISTD 17.09 301.3 Mettiyltestosterone 1,209.250 200 ng/ml 12.27 438.4 Andro -D4 glue 62,604 163 ng/ml 4.22 372.3 Saibutamol -D3 814,633 226 ng/ml 12,30 434.4 Androsterone 846,467 230 ng/ml 12.52 434.4 Etiocholanolone 813,037 215 ng/ml 12.70 241.2 5a3a diol 197,002 96 ng/ml 12.88 241.2 5b3a diol 439,619 224 ng/ml 17.85 117.1 Pregnanediol 10,142,344 1316 ng/ml 0.00 434.4 DHT ng/ml 0.00 432.4 DHEA ng/ml 14.30 432.4 Epitestosterone 116,467 14 ng/ml 15.20 432.4 Testosterone 575,745 61 ng/ml 0.00 371.3 THC-M ng/ml 0.00 369.3 Saibutamol -45 ng/ml 0.00 522.5 1 1 bOH Etiocholanolone ng/ml 0.00 548.5 THS ng/ml 0.00 636.6 THF ng/ml 0.00 632.6 Cortisol ng/ml 14.68 343.3 1 1 Keloetiocholanonlone 183,640 65 ng/ml 10.25 432.4 3a-5C 23,035 ng/ml [Surface] [concentration] Valeurs conventlonnelles de relet Ad4a)u/SI*100 5.2 <19.1 T/ET Testosterone Epitestosterone 4.9 60.6 13,7 Rapport > 4 Concentration > 200 Concentration >200 Androsterone Etiocholanolone DHEA 230 215 Concentration > 10000 Concentration > 10000 Concentration > 200 DHT Andro / Etlo 5a3a / 5b3a diol 1.0 0.4 Concentration > 20 Rapport > 3 Rapport > 2 THC -M Salb/SalbD3M00 0.0 ■45.0 Concentration >15 Concentration > 75 Cortisol /THS THF/THS 11 bOHetio/THS THF Sl/3a5c 52.5 #DIV/0! #OIV/0! #DlV/0! Pour info (R&D) USADA 0054 k^ File: C:\MSD18\JUILLET06\2107\21h08.D\da 'OperaEor: m37p35 Date Acquired: 21 Jul 06 7:36 pm Instrument: GC MSD Method File: MAN06B__B.M Sample Name: 178/07 995474 H Misc Info: Vial Number : 11 Andro -D4 glue Methyl testosterone Abundance 30000001 2000000 1000000 0^'f TIC: 21ti08.O\datasi[n.ms Abundancelon 438.40 (43B.10 lo AOundancelon 301.30 {301.00 to 'I * , 1 ^ I I i *^ J', I I I 15O0 11.719 1 12-J67 1O00 ft 500 r k JH 1 1 1 1 1 ' ' ' ' 17. wg 20000 10000 .„^u_ _-v_ ' ' ' ■ 1 , . . . ,-ime-> 5.00 loioo isioo 20^00 25.00 Time-' 11.50 12.00 Tlme-> 16.00 17.00 5albutamol -D3 Cortisol D4 Andro-Etio di TMS Andro-Etio mono TMS-^ \bundancelon 372,30 (372.00 Abundancelon 636.60 (636.30 Abundancelon 434.40 (434.10 Abundance on 272.20^tg7?90 4.120 ^0000 i2-|BtE|B24 on 362,30 ll^BOO 15000 1 0000! i 5000 j 01 :■,";-: . rr-r-^ . 'tnne"> 4.00 4.50 Time-> 22.50 15000 10000 5000 23.37 Time-> 12.00 12.87 Tlme-> 10 33a-5b3a Diol .1 5b <: trait : IRMS EpitestoStfirone - Testosterone THC -M ibundancelon 2-11,20 [240.90 Abundance Ion 432.40 (432,10 to433.10): 21h08.DUalasim,ms Abundancelon 371,30 [371.00 10000. 5000 12|81 12-698 ol V , . ■ime-> 12.30 10OO0 5000 u 15rt96 14.313 1000 500 13.17 Time-> 14.00 14.20 14.40 14.60 14.80 15.00 15.20 15.40 Trme-> 17.00 THE THS 11 BOH A/E .?ortisol bundancelon 632,60 (632.30 Abundancelon 636.60 300 200 100 'Wi Vw/V 17.86 636 30 Abundancelon 54B.50 (546.20 Abundancelon 522.50 (522.20 800 2000 ■ime-> 22.50 1000 23.37 Time-> 21.50 22!37 Tinne~> 21.00 2ll86 Time-> 15.30 16.17 Page 1/16 USADA 0055 So