• — 1 i r i U LNDD ENREGISTREMENT Code: Version : Date; E-RECAP-OI J FICHE RECAPITULATIVE DES ANALYSES PRESENTEES N° de laboratoire : J(^^ N° echantillon : lb'=f^S^>t^ Produit{s) confirme(s) : Ar^.*J^« IE%,=^opS' Essai n° ; EC ^ Version : Version : CG/SM3 CLAJV Cytometrie "™"ioi iMiffira™ Mode operatoire de preparation : | M-EX- 2M Ci Ivlode operatoire d'analyse : M-AN- SZjU\ CG/SM(SCAN) 0? CG/SM(SIM) CG/SM2 CL/SM CL/SM2 CL/SM3 IMM EPO CG/C/IRMS o/ Essai n° : EC Version : Version :] }/SM (SCAN) CL/UV Mode operatoire de preparation ; M-EX- Mode operatoire d'analyse : M-AN- CG/SM (SIM) CL/SM (SIM) CL/SM2 CL/SM3 CC Concentration estimee 1 * Concentration corrigee Essai n" : Version : Version : i/SM (SCAN) [ Mode operatoire de preparation : Mode operatoire d'analyse ; M-AN- IMM CGH'SD \2 CG/SM (SIM) cc Concentration mesuree * Seui! corrige : ! ES02 -BBS (CG-SM) ES08 -HES (CG/SM) ES02C -EPH (CG/SM) ES08B -PS ES03 -CD (CL/SM) ES03B -LCH (CIVSM/SM) ES04 -H (CG/SM) ES05 -MS2 (CG/SM/SM) ES03C -LCH (CL/SM) ES06 - IMM ES07 -EPO ESSOl - HBOCs ESS02 - TS Code operateur de I'analyste : Xa Code operateur dt Date et paraphe :o^oS(c>G /^ Date el paraphe : Hors portee d'accreditation : | Raison ou numero d'ecart de la declaration en hors portee : responsabie : U^ X * a remnlir nar le resnonsable Cet enregistrement est a archiver dans le dossier de confirmation USADA 0294 ^5 f] I ," I L- i ; n LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX -24 Version : C Date : 17/01/2006 1/4 METHODE DE PREPARATION POUR LA CONFIRMATION DE L'ORIGINE DES METABOLITES DE LA TESTOSTERONE PARGC/r/TTIMS Documents utilises : E-TE-OSC, I-VOL-01, 1-EX-OS, I-EX-O?. I-EX-08 et I-TRAC-03C Remplir la fiche de prtparation - confinmtion/ centre expertise en CPG/OSMRI E-TE-03C Operations Materiel Prise d'essai selon I-VOL-OI 8 m! maximum par tube Centrifiigation 5 minutes Transvaserlc sumageant dans tube prelablemcnt identifies (cfl-TllAC-OSC) Extrairc sur SPE Rapid Trace selon I-EX-06 Evaporation a sec Ajouter 1.5 ml dc tampon phosphate pH = 6.5 Agiter jusqu'a dissolution complete Ajouter 2 gouttcs de P-glucuronidase Boucher ct agiler 1 seconde HydrolyserlhOOA55°C Centrifiigation 5 minutes Transvaser le sumageant dans tubes prealablement identifies (cfI-TRAC-03C) Extrairc sur SPE Rapid Trace selon I-EX-07 Evaporation a sec Tubes Kimble 16x100 mm Pipette Biohitl -5ml Cones Biohit Ccntiifugeuse 4000 tr/min Tubes Kimble 16x100 mm Pipette Pasteur Cartouches Bond Elut CI 8 SOOmg Tubes Kimbles 16x100 mm Bain ^ sec a 60°C Dispcnsette Vortex Compte gouttc Bouchons Zymarck Vortex Etuve Centrifugeuse 4000 tr/min Tubes BCimblc 16x100 mm Pipette Pasteur Cartouches Bond Elut CI 8 200mg Tubes Kin*le 13x100 mm Bain a sec a 60°C Reactifs et produits APPLICABLE le ASSURANCE QUALlie LNDD Azote Tampon Phosphate pH = 6.5 Chambre froide a +4''C (cf M-P-05) p— glucuronidase Chambre froide a +4''C Azote USADA 0295 (6 LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX -24 Version : C Date :17/01/2006 . 2/4 METHODE DE PREPARATION POUR LA CONFIRMATION DE L'ORIGINE DES METABOLITES DE LA TESTOSTERONE PAR Gr/r/lRM<; OperatJoos r- L' L: Dissoudre et reunir dans un tube les cxtraits du meme echantillon : Mettre de cote un tube sec Ajouter 500 jil d'acetonitrile dans les autres tubes ct agitcr 10s avant de les transvascr dans le tube sec Rincer les tubes transvases avec 500nl d'acetonitrile Evaporation a sec Ajouter 50 ^l\ de pyridine Ajouter 50 ^il d'anhydride acetique Reprcndre par rotation legcre du tube en position quasi horizontale Agiter 5 secondes et bouchcr Deriver le tube bien fenne IhOO i 60=Cou laisser une nuit a temperature ambiante Evaporation a sec Ajouter 1 mi d'acetonitrile Agiter 10 secondes Ajouter I ml d'cau ultrapurc Agiter 1 secondes Extraire sur SPE Rapid Trace selon l-EX-08 Evaporation a sec des fractions Fl (environ 2hO0) F2 {environ Ih30) F3 (environ 45niin) Materiel Pipcttman de 1 ml Pipette pasteur Vortex R^ctife et produits Acetonitrile Pipcttman de I ml Pipette pasteur Bain k sec a 60°C Pipettman de 50 pi - Cones Greincr Vortex Vortex Acetonitrile Azote Bain a sec a eCC ou Portoir a tubes sous hotte Bain i sec a 60°C Pipette Biohit 1-5 ml Cones Biohit Vortex Cartouches Baker CI 8 500 mg Tubes kimble 13x100 mm Bain a sec a 80''C Pyridine dessech6e Anhydride ac^ique > 99% SPECIMEN Azote Acetonitrile Eau ultrapure Azote USADA 0296 6> r I ' I Lr- I L.! j I L r: LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX -24 Version : C Date : 17/0 1/2006 3/4 METHODE DE PREPARATION POUR LA CONFIRMATION DE L'ORIGINF np. !^^g3:^gQLn:gSDELATEST0STER0NE PAR nr^r.u"^^'^^ ^^^ Traitement des fractions Fl, F2 et F3 Operations Ajouter Ic SI selon I-VOL-0 1 Ajouter200 \i[ d'acetonitrile Reprendre par rotation legere du tube en position quasi horizortalc Ccntrifiigation 5 minutes Transferer dans les vials prealablement identifies selon I-TRAC-03C Evaporation a sec Reprendre dans de I'hexane scion 1-VOL-OI Scrtir cl Agiter 1 secondes Materiel Reactifs et produit^ ■■ volume ajoute Pipettman regiable de 200 ^1 Cones Greiner Centriftigeusc 4000 tr/min Vials en verre avec insert 300 ^1 ou vials en verre de 1.5ml selon le volume Bain a sec i SO'C Acctonitrile SPECIMEN Azote Pipettman regiable de 200 jil ou Iml Hexane Capsules a sertjr - Vortex ^ U U L_) u Apres analyse GC/MS : Reajustement du SI si nicessaire (Cf.I-VQL-Ol) Agiter 10 secondes Seringue Hamilton de 50 jil ou de 100 Hi selon le volume ajoute Evaporation i sec | Bain a sec a eO'C Reprendre dans de I'hexane (CfI-VOL-01) Scrtir et Agiter 10 secondes Pipettman regiable de 200 ft] ou 1ml Capsules k sertir - Vortex Androstanol acetate H67 0.2mg/m Azote Hexane USADA 0297 a Lj LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX -24 Version ; C Date :17/01/2006 4/4 METHODE DE PREPARATION POUR LA CONHRMATiON DE L'ORIGINE DES METABOLITES DE LA TESTOSTERONE PAR CT/r/IRMS n ri Action redige par verifie par verifie par approuvd par Personpe concemee Cynthia MONGONGU Corinne BUISSON Aurelie LAURENT N° Version I B Jacques DE CEAURRIZ Creation du document. Modification des quantites de SI et dACN, ajout d'une remarque sur rimportance de la rotation des tubes A -->Passage de projet en document valide temps/temperature acetylalion modification changement de cartouche pour la premiere extraction addition d'une nouvelle firaction d'analyse reunion des aliquots d'un meme echantiilon avant derivation I'evaporation des phases organiques se fait maintenant sous azote fE- INFOdu 10/05/04) changement de cartouche pour la premiere extraction addition d'une nouvelle fraction d'analyse reunion des aliquots d'un meme echantilton avant derivation I'evaporation des phases organiques se fait maintenant sous azote fE- INFOdu 10/05/04) ^ changement SE en SI et aiout analyse GC/MS avant GC/C/IRMS 14/10/2002 04/02/2004 16/07/2004 17/01/2006 Lj SPECIMEN USADA 0298 ^3 ^1 ; I i I i n n r- '■ Codification : E-TE-03C Version: G Date: 17/01/2006 . i/4 nCHE DE SUIVI DES ALIQUOTES - CONFIRMATION / CONTRE EXPERTISE EN GC/C/IRMS Mode operatoire d'extraction: M-EX-24 Echantillon : : \jrm^ "5 RS^c^:^ Sexe : M Misea I'ambiant de Pechantillon : Date : |ogfloy}cJ:;) Heure : 1 'S*^ l^. Prise d'essai: Volume: ^O mL Heure: -^I'^QS I Paraphe: { J^^ j pH Densite Date cmc^<^Q o"V)ci?(cG Appareil pHmet n" : ^ Refract n' : J^ Temperature en "C 21, n;n?-FP, 1 Paraphe >^f SQ^ Bainasec(BSE):HM Lieii-rH-Fp ] ^^ Code du SI C0,2nig/inL) : H67- co^yr BainasecCBSE):35J Lieu : CTT-FR i :i^ ^^y Analyse nar CG/MS [ 1 Fraction FI Fraction F2 Fraction F3 Volume SI (^1) 3 ^to 3 Volume hexane (^I) .JLoo ^-SO —LOO USADA 0300 ^1 r. I ■ i ; LNDD E^fREGISTREMENT Codification: E-TE-03C Version ; G Date: 17/01/2006 3/4 FICHE DE sum DES ALIQUOTES - CONHRMATION / CONTRE EXPERTISE EN GC/C/IRMS Atitres operationji (dilution, reinjection...) Operation Date Heurede debut Recupere a Identification du materiel utilise Paraphe Analyse oar GC/C/IRMS Fraction Fl Fraction F2 Fraction F3 Volume total SI preleve (^I) ^3 n + Volume final hexane (^il) ^■so fSO wr USADA 0301 U LNDD ENREGISTREMENT Codification : E-TE-03C Version : G Date: 17/01/2006 4/4 FICHE DE sum DES ALIQUOTES - CONFIRMATION / CONTRE EXPERTISE EN GC/C/IRMS Operation Repise par Hexane Injection GC/C/niMS Date d^io£>(d^ E^l-offviG. Identification du materiel utilise ISOPRIME^ Paraphe 35r i I u n ■■ i I I "r, Autres ooerations (concentration, dilution, reiaiection ) Operation Date Heure de debut Recupere a Identification du materiel utilise Paraphe I i Hearts n" : U Cet enregisirement est a mettre dans le dossier de confirmation de Vichantillon USADA 0302 '^'^ TOPLEVEL PARAMETERS Save Copy of Method Wich Data "^■^^^ Pre-Run Cmd/Macro = Instrument Control Pre-Bun Cmd/Macro = Data Analysis Pre-Run Cmd/Macro = Data Acquisition Data Analysis "S'^O^ Post-Run Cmd/Macro = Instrument Control Post-Run Cmd/Macro = Data Analysis Post-Bun Cmd/Macro = Comments : is the default method X) ,Me thod This END OF TOPLEVEL PARAMETERS INSTRUMENT CONTROL PARAMETERS 68 90 GC METHOD DVEN [ i Initial temp : ; I Initial time : L- ' Ramps : # Rate i-i 1 3 0.00 ' : 2 10.00 L- 3 O.O(Off) Post temp; 70 'C Post time: Run time: i : 7 -C (On) 1 . 00 min Final temp 270 300 0.0 min 2 5.67 min Maximum temp: 325 'C Equilibration time: 0.50 min Final time 12 . DO 3.00 fRONT INLET ( S PLIT /S PLITLESS ) Mode: Splitless Initial temp : 280 'C [On) Pressure: 145.0 kPa (On) Purge flow: 20.0 mL/min Purge time: 2,00 min Total flow: 25.4 mL/min Gas saver: Off Gas type: Helium r ■■ i r L; BACK INLET [UNKNOWN! 3LUMN 1 Capillary Column Model Number: Agilent 19091s-433 Max temperature: 325 'C Nominal length; 30.0 m Nominal diameter: 250,00 um Nominal film thickness: 0,25 um Mode: constant pressure Pressure: 145.0 kPa Nominal initial flow: 2.3 mL/min Average velocity; 56 cm/sec Inlet : Front Inlet Outlet: MSD Outlet pressure: vacuum COLUMN 2 (not installed) athod: MAN 52. M Fri Aug 04 10:24:41 2006 Page: 1 USADA 0303 -^1, ^RONT DETECTOR { ) BACK DETECTOR [ ) SIGNAL I Data rate: 20 Hz Type L test plot Save Data : Off Zero: . (Off) Range : Fast Peaks: off Attenuation: ^COLUMN COMP 1 [No Detectors Installed) THERMAL AOX 2 Use: MSD Transfer Line Heater Description; :_ Initial temp: 300 'C (On) Initial time: 0.00 min # Rate Final temp Final time 1 O.O(Off) SIGNAL 2 Data rate ; 20 Hz Type; test plot Save Data: Off Zero: . (Off) Range : Fast Peaks : Off Attenuation: COLUMN COMP 2 (No Detectors Installed) JIME TABLE Time Speci f ier POST RUN Post Time : 0.00 min Parameter & Setpoint 7 673 Inj ector n l: Front Injector : Sample Washes Sample Pumps Injection Volume Syringe Size Postlnj Solvent A Washes Postlnj Solvent B Washes Viscosity Delay Plunger Speed Prelnjection Dwell Postlnjection Dwell p Back Injector: o parameters specified Column 1 Inventory Number ■ Column 2 Inventory Number U 3 1.0 microliters 10.0 microliters 3 3 3 seconds Fast 0.00 minutes O . minutes MS ACQUISITION PARAMETERS f sneral Information ^une File I ;:quistion Mode : atune . u : Scan .■^S Information Solvent Delay ■ *5 Absolute l_^ Offset Resulting EM Voltage '• Scan Parameters ] "Vow Mass =thod: MAN 52 . M 9. 00 min False 1905 . 9 50 . Fri Aug 04 10:24;41 2006 Page: 2 USADA 0304 '>-5 ^igh Mass Threshold Sample # '-'Plot 2 low mass ?lot 2 high mass [MSZones] 3S Quad IS Source 550. 150 2 50. 550 .0 150 C 230 C R/D Samples maximum 200 C maximum 250 C r-s L; END OF MS ACQUISITION PARAMETERS END OF INSTRUMENT CONTROL PARAMETERS DATA ANALYSIS PARAMETERS ^Method Name ; C: \MSDCHEM\1\METH0DS\MAN 52 . M Percent Report Settings I \—^ — ^ . ^ort By: Signal ^iutput Destination Screen: No '~'' Printer: Yes File: No r , integration Events; Autolntegrate Generate Report During Run Method: i iignal Correlation Window; 0,020 No ualitative Report Settings "eak Location of Unknown: Apex library to Search C: \temp\IRMS -L Minimum Quality 90 ntegration Events: Autolntegrate Report Type; Summary . lUtput Destination _ Screen: No Printer : Yes - , File : No _enerate Report During Run Method: No quantitative Report Settings ethod: MAN 52 .M Fri Aug 04 10:24:41 2006 Page: 3 USADA 0305 % Report Type: Summary ' Jutput Destination ^ Screen : Yes Printer: No File: No r- ;enerate Report Daring Run Method: No Calibration Last Updated : . teference Window; 10.00 Percent 'iJon-Reference Window: 5.00 Percent Correlation Window: 0.02 minutes ■Oefault Multiplier: 1.00 Jefault Sample Concentration: 0,00 Compound Information r i , *** Empty Quantitation Database *** r": u [1 END OF DATA ANALYSIS PARAMETERS a Fri Aug 04 10:24:41 200G I -I I ■ r J ■ I ; u f; I ■ .Method: MAN 52 . M Fri Aug 04 10:24:41 2006 Page; 4 USADA 0306 "^^ r"; U f] U. u Sequence Name Comment Operator Data Path Top Instrument Control Data Analysis C: NMSDChem\l\seqLience\2 00 6\Aout0 6\0 4 8.S 26 D: \MSD2 2\AOUT06\04 08\ Pre-Seq Cmd: Pre-Seq Cmd: Pre-Seq Cmd: '^°P Post-Seq Cmd Instrument Control Post-Seq Cmd Data Analysis Post-Seq Cmd Method Sections To Run (X) Full Method ( ) Reprocessing Only On A Barcode Mismatch (X) Inject Anyway I ) Don't Inject r"i L I Li r-i , I I"" Line 1 ) Cal ibrat ion Dataf lie Method Blank Sample Datafile Method Blank 5) Sample Datafile Method Blank Sample Datafile Method Sample Name /Mi sc Info 2) 3) 4) 6) 7) 6 7 040BMixAc01 MAN_52 blLilf3 MAN_52 17807474f 3 MAN_52 blulfl MAN_52 n807474f 1 MAN_52 blljlf2 MAN_52 17807474f2 MAN 52 Blu 1 F3 Blu 1 Fl Blu 1 F2 Sequence v^rifi^e par ; .Jl£.. Remarques : Last Modified: Frl Aug 04 08:53:33 2006 Page : 1 USADA 0308 ^ IJ t n Lj i I D:\Msd2Z\Aout06l04a8t0403MixAc01. D Data File Name 040SMrxAc01 . D Data File Path D:\Msd22\Aout06\0408\ Operator 26 Date Acquired 8/4/2006 9:43 Acq. Method File MAN_52.M Sample Name Mix Ac 50 Vial Number 1 Misc Info Mix Acetate 001 50 ng injects Temps de retention, ta mps de retention relattf et target Sional IMA) Nam^ 5a Andfostano) AC Etiochofanolone AC Androsterone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b diol diAC 1 1 KetoEtiocholanolone AC 5b Preanan 3a POfi diol diAC M2 signal Nam^ 5a Androstanol AC Etioctiotanoione AC Androsterone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b diol diAC 11 KetoEtiocholanolone AC 5b Preanan 3a 20a dini rilAC Ret TimR Rel Ret TimP 10.70 14.37 14.63 15.19 15.58 17.09 243 257 257 316 241 191 1.343 1.368 1.420 1.457 1.597 1-796 15,126,010 17,606,726 19,683,079 24,536,719 21,410,205 30,056,893 25.B22Q25 Target Signal Target Rpsnm^ 258 272 272 256 316 271 284 Q1 signal Q1 ReRnnn se 01 R^hn 103.9 63.0 42.7 90.8 57.6 81.9 56.3 14,559,348 27,927,453 46,140,764 27,022,036 37.046,436 36.707,461 ■*5.89203e M3 signal Lj Name 0? Binnal Q2 Ratio 5a Androstanol AC 204 8,054,385 55.3 Etiocholanolone AC 201 10,596,971 38.0 Androsterone AC 218 13,895,009 30.1 5b Androstan 3a 17b diol diAC 241 20,649,090 75,4 5a Androstan 3a 17b diol diAC 256 16,348,951 49.5 11 KetoEtiocholanolone AC 5b Preanan 3a JDa diol riiAC 286 22,112,785 60.2 344 12.634 5.^? ?Rn Page 1 of 2 C:\MS DCHEM^CUSTRPT\MAN52.CRT 8/4/2006 10:14 AM USADA 0309 ^0 D:lMsd22\Aout06\D4D8\04DBMJxAc01 .0 i I I , 5a Androstanol AC EtiocholanoloneAC n__n . Androsterone AC tJTttrjI^asHara SJg=u^AJ JC 5b Androstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b dioF diAC .,,,,,,,:^.,,^. i\ iM- ,„„, A n ■ **■•" / \ /I l_ Li 11 KetoEtiocholanolone AC 5b Pregnan 3a 20a diol diAC 1 1 - A Page 2 of 2 C:\MSDCHEII/HCUSTRPT\MAN52.CRT 8/4/2006 10:14 AM ■-\ USADA0310 ^/ tr! lJ r\ n r; D:VUsd 22tAoutOGI0408lbl u1 f1 .D Data File Name blulfl.D Data File Path D:\Msd22\Aout06\040e\ Operator 26 Date Acquired 8/4/2006 14:26 Acq. Mettiod File MAN_52.M Sample Name Blu 1 F1 Vial Number 4 Misc Info Blanc urinaire 1 Pool 4 Fraction 1 dans lOOpL Temps de retention, tem ps de retention relatJf et target Sronal fMlf Nam^ 5a Andrastanol AC Etiocholanolone AC Androsterone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b diol diAC 1 1 KetoEtiocholanobne AC 5b Preanan 3a 20a dinl ijiiAi;; : M2 signal Name 5a Androstanol AC Etiocholanolone AC Androsterone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 1 7b diol diAC 11 KetoEtiocholanolone AC 5b Preanan 3a 20a riifil dlAH Ret Time Rei Ret Timp 10-67 0.00 0.00 0,00 0.00 17.01 _aoo 243 257 257 316 241 191 .2^ 0.000 0.000 0.000 0.000 1.594 0-QOO Tgrqgt .Signal Target Rf^^nnn^o 5,774,860 22,757,434 2 258 272 272 256 316 271 _2S4 5,520,561 27,655,670 91 ?iq^'^' Q1 Resnonse Q1 Ratin 104.6 0.0 0.0 0.0 0,0 81.7 00 M3 signal \ I Nam^ 5a Androstanol AC Etiocholanolone AC Androsterone AC 5b Androstan 3a 1 7b diol diAC 5a Andnsstan 3a 17b diol diAC 11 KetoEtiochoIanolone AC Sb Preanan 3a 20a dim ^i^n Q2 siongl 204 201 216 241 256 286 344 Q2 Resnnn^^ Q? Ra^j■;1 3,105,342 16,920,850 56.3 0,0 0.0 0.0 0.0 60.7 00 Pagei of 2 C.IMSDCHEIVHCUSTRPT\MAN5Z.CRT 8/4/Z006 2:64 PM USADA0311 ^2; D.'Msd22Mouia6\IM0SUjluiri.D Sa Androstanol AC I ' : L-.J Etiocholanolone AC Androsterone AC H ^. ^ 5b Androstan 3a 17b diol dlAC i^.™-^.^^.i?.r-^.}Js SiinF A 5a Androstan 33 17b diol diAC s^ jsjT igt ijiji i?i ?T ;^jj^ Tj^lHP 11 KetoEtiochoianolone AC 1 ' 5b Pregnan 3a 2Da diol diAC ^ tpa*)*"* arr, tt= !Tn ^:r;'il ^ Page 2 o( 2 C:\MSDCHEM\CU5TRP"nMAN52.CRT 8/4/Z006 2:54 PM ■-\ US ADA 0312 S u r; n r ■ I : D:>Ma(l22iAout06V0408\17807474H,D Data File Name 17807474f1.D Data File Path D:\Msd22\Aout06\0408\ Operator 26 Date Acquired 8/4/2006 14:59 Acq. Method File MAN_52.M Sample Name 178/07 B995474 F1 Vial Number 5 Misc Info 176/07 B 995474 Fraction 1 dans lOO^L ^^^mL .....^...^j Ji'i ni^ A Temps de retention, temos de retention relatifet target Signal fM1) blsms SaAndrostanol AC Ret TimR 10,68 Rel Ret TimP Target Signal 258 Target Rssrinn^p 5,012 619 Etiocholanolone AC 0.00 0.000 272 Androsterone AC 0.00 0.000 272 5b Androstan 3a 17b diol diAC 0.00 0.000 256 5a Androstan 3a 17b diol diAC 0.00 0.000 316 11 KetoEtiocfioianoione AC 17.05 1.596 271 46 222 964 5b Preonan 3a ?ns rlinlHiAr^ nnn nnnn 284 M2 signal Name 5a Androstanol AC Etiocholanolone AC Androsterone AC 5b Andnsstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b diol diAC 11 KetoEtiocholanolone AC 5b Pregnan 3a 20a riiol rilAt;^ Q1 signal 01 Response Q1 Ratin 243 257 257 316 241 191 5,291,627 36,126,360 105.6 0.0 0.0 0.0 0.0 78.2 -JUL- M3 signal F ■ I ' iism£. ( ^ 5a Androstanol AC Etiocholanolone AC Androsterone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b diol diAC 11 KetoEtiocholanolone AC 5b Preonan 3a ?f)a riifil rilAr 92 signal 02 Response 204 201 218 241 256 286 344 3,048,558 28.286,843 Q Q2 Ratio 60.6 0.0 0.0 0.0 0,0 61.2 00 Page 1 of 2 C:1MSDCHE imCUSTRPT\MAN52.CRT 8M/2006 3;27 PM USADA0313 % ^f D:lMsd22\Aout06lM08\1 7B07474f1.D Sa Androstanol AC ■!■!•; ~!»?^aj •f" :■■! ;!|H!!T!|| fi «-»«• »H»V •aoMb .-«.«» H*MH :iE ■*"*'^ M''1fc> --L I .. --— /"-^-n..'. n Etiocholanolone AC ::™ j' ■ ;"— t '• -' ■ ,t^ T. ». 1^ ,V ,,fc, ,,,„ ,__, ,_„ ,,_„ ,,^ "" [ Androsterone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC r !i?i«r5i"m"F»T:m j-^-jmn 5a Androstan 3a 17b diol diAC 11 KetoEtiocholanolone AC i I LI 5b Pregnan 3a 20a diol diAC Page 2 of 2 C :\MS DCHEM\CUSTRPT\MAN52.CRT 61412006 3:27 PM USADA0314 55 D;Wlsd22\AouKIE\D408\bluin.D Data Fiie Name blu1f2.D Data File Path D:\Msd22\Aout06\0408\ Operator 26 Date Acquired 8/4/2006 15:31 Acq. Method File MAN_52.M Sample Name Blu 1 F2 Vial Number 6 Misc Info Blanc urinaire 1 Pool 4 Fraction 2 dans 400^JL Temps de retention, temps de retention relatif et target Signal (Mil L Name Rel Timp Rel Rfit Timp Tamfit Rionai Tarnpt Resnonse 5a Androslanol AC Etiocholanolone AC Androsterone AC 5bAndrostan 3a 17b diol dlAC 5a Androstan 3a 1 7b diol diAC 11 KeloEtiochoianoloneAC 5b Preanan 3a 20a diol diAC 10.68 14.40 14,68 0-00 0.00 0.00 0.00 1.348 1.375 0.000 0.000 0.000 noon 258 272 272 256 316 271 284 20,287,078 77,262,593 150,213,193 M2 signal Name 01 Rinnal 01 ResonnRP 01 Ratio 5a Androstanol AC 243 20,899,494 103.0 Etiocholanolone AC 257 47,707,175 61.7 Androsterone AC 257 63,281,939 42.1 5b Androstan 3a 17b diol diAC 316 0.0 5a Androstan 3a 17b diol diAC 241 0.0 11 KeloEtiochoianoloneAC 191 0,0 5bPreanan3a20adioldiAC 269 0.0 I ■' M3 signal (""; Name 02 Bional 02 Resnonsfi 02 Ratio 5a Androstanol AC 204 11,082,620 54.6 Etiocholanolone AC 201 27,413,943 35.5 Androsterone AC 218 42,679,798 28,4 5b Androstan 3a 17b diol diAC 241 0.0 5a Androstan 3a 17b diol diAC 256 0.0 11 KetoEtJocholanoione AC 286 0,0 5b Preanan 3a 20a diol diAC 344 on Li I , Page 1 of 2 C:\MSDCHEIVHCUSTRPT\MAN52.CRT S/4/2006 3:58 PM USADA0315 ^£ D:\UsdZ2lAoutl)6V0406U]lu1fZ.D 5a Androstanol AC n y n a n u D n Etiocholanolone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC y Androsterone AC F=?^?ra?!?r-; WE=?^'=1 Ei-SK:^ T^ A /^ . J\ 1/ ■ 5a Androstan 3a 17b diol diAC = S:3!IfT;:?^53Jr?^' ^ ^'T^Tr 1 !\ :\ ' i := - -1 = « - — lO lJ 11 KetoEtiocholanolone AC '•—1 !?E]'l'.'!?!tip^'!::'iL',VJii!'S^fy^ ^ / i f^ ;. /\w. ™ w^XX/ '^^^^^^'^^Jl^^fc ^j^ift*,^ ,.rt T--* '«-« ^**« H'.M ITI* ^'.» ..« ..-= *-.« 1 5b Pregnan 3a 20a diol diAC ■ I""', ! I Page 2 of 2 C:\MSDCH EM\CUSTRp-nMAN52.CRT 8/4/2006 3:56 PM USADA0316 n D:\M8d22\Aout06mOB\17B0747«2.D Data File Name 17807474f2-D Data File Path D:\Msd22\ftout06\0408\ Operator 26 Date Acquired 8/4/2006 16:03 Acq. Method File MAN_52-M Sample Name 178/07 B995474 F2 Vial Number 7 Misc Info 178/07 B 995474 Fraction 2 dans 400|jL : [ r~' ( Temps de retention, temps de retention relattfet target Signal (MH jisms. 5a AndrostanolAC Etioctiolanolone AC Androsierone AC 5b Androstan 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b diol diAC 11 KetoEtiocholanoloneAC 5b Preqnan 3a 20a diol dJAp ^fitTime Rel Ret Tims 10.67 14.37 14.63 0.00 0,00 0.00 OOP 1.346 1.371 0.000 O.OOO 0.000 000 Tgr-flgt giansl Target Response M2 signal 256 272 272 256 316 271 -224 i„: Namft 01 sional 01 RfisDonse 01 Ratio 5a AndrostanolAC 243 3,645,367 105.7 Etioctiolanolone AC 257 34,755,167 61.9 Androsterone AC 257 28,337,297 42-6 5b Androstan 3a 17b diol diAC 316 0.0 5a Androstan 3a 17b diol diAC 241 0,0 1 1 KetoEttocholanolone AC 191 0.0 5bPreanan3a20ariiolriiAC 269 00 3,447,735 56,129,234 66,514,969 M3 signal j I I ' Name 02 sianal 02 ResDonse 02 Ratio 5a Androstanol AC 204 1,986,261 57.6 Etioctiolanolone AC 201 20,012,288 35.7 Androsterone AC 218 19,275,305 29.0 5b Androstan 3a 17b diol diAC 241 0.0 5a Androstan 3a 17b diol diAC 256 0.0 1 1 KetoEtiocholanolone AC 286 0.0 5b Preonan 3a 20s diol diAC 344 0.0 Page 1 of 2 C:\MSDCHEM\CUSTRPT\MAN52. CRT 8/4/2006 4:31 PM US ADA 0317 ?? D:\M8d22\Aout0WIM0811780T474f2.D n - 1 ; u I LJ f] LJ Etiocholanolone AC 5a Androstanol AC — . , h -* —^ -M. 1 Sb AndrosUn 3a 17b diol diAC 5a Androstan 3a 17b diol diAC /■ :^?ZT^-?i-:^r- -■^-?T : -Tsi'^'ir--: f — -- 1 - -■- ; \ I • 1 \ 1 ■" i _^ y ^ '", _^___ ■ -' " ■' — — — — — 11 KetoEtiocholanolone AC Page 2 ol 2 C:\MSDCHEM\C USTRP"nMAN52. CRT 8/4/2006 4:31 PM US AD A 0318 © D:tMsd22MciuiaGia40S\btu1f3.D Data File Name blu1f3.D Data File Path D:\Msd22\Aout06\0408\ Operator 26 Date Acquired 8/4/2006 13:22 Acq. Mettiod File MAN_52-M Sample Name Blu 1 F3 Vial Number 2 Misc Info Blanc urinaire 1 Pool 4 Fraction 3 dans IOOjjL r Temps de retention, temps de retention relatif et target Signal (M1) I ; Name Ret Time Rel Ret Time Tarael Sional Taroet Resoonse 5a Androstanol AC 10.69 258 5,912,258 Etioctiolanolone AC 0.00 0-000 272 Androsterone AC 0.00 0,000 272 5b Androstan 3a 17b diol diAC 15.19 1.421 256 30,691 ,343 53 Androstan 3a 17b dtol diAC 15.54 1.453 316 9,191,814 11 KetoEtiocholanolone AC 0.00 0.000 271 5h Preonan 3a 20a diol diAC 19.17 1.793 284 28 874 790 M2 signal Name 01 sianal 01 Resoonse 01 Rafin 5a Androstanol AC 243 6,184,142 104.6 Etiochoianolone AC 257 0,0 Androsterone AC 257 0.0 5b Androstan 3a 17b diol diAC 316 28,217,276 91,9 5a Androstan 3a 17b diol diAC 241 5,536,180 60.2 11 KetoEtiocholanolone AC 191 0,0 .-Sh Prennan Sa ?0a diol diAC ?B9 16 1R9 201 5R1 M3 signal NamR 02 sianal 02 ResDonse 02 Ratio 5a Androstanol AC 204 3,235,828 54.7 Etioctiolanolone AC 201 0-0 Androstercine AC 218 0.0 5b Androstan 3a 17b diol diAC 241 23,375,042 76.2 5a Androstan 3a 17b dioidiAC 256 4,622,981 50.3 11 KetoEtiocholanolone AC 286 0.0 5t) Preonan 3a 20a diol diAC 344 8.02R.255 27 8 Page 1 of 2 C;\MSDCHEM\CUSTRPTMVIAN52.CRT e/4/200S 2:36 PM US ADA 0319 30 D :\MsdZ2\Aout06\D4QS\blu1f 3 . D u; 5a Androstanol AC n Etiocholanolone AC Androsterone AC ■"'"'m F ; I \ I 1 L... l_i 5b Androstan 3a 17b diol dJAC 11 kPtoEtlocholanotone AC iCim::: -iMiUii'miiK. y k -/rf. 5a Androstan 3a 17b diol dJAC 5b Preanan 3a 20a diol dlAC Page 2 ot 2 C:\MSDC HEM\CUSTRp™(IAN52.CRT 8M/2006 2:36 PM USADA 0320 31 '."'■ 11' ri r-: , i • ( n i u \ ■ u D:\Msd22lADutOEl040B\17BaT474f3.D Data File Name 17807474f3.D Data Fiie Path D:\Msd22\Aout06\0408\ Operator 26 Dale Acquired 8/4/2006 13:54 Acq. Method File MAN_52.M Sample Name 178/07 B995474 F3 Vial Number 3 Misc Info 178/07 B 995474 Fraction 3 dans lOOuL Kb«L.r-.4dMF-^.>>_ X. Temps de retention, temps de retention relatifet target Signal (Mil Ni^me Rpt Timfi Rel Ret Timp Tamel Sinnal TarnRt ResDonsR 5a AndrostanoIAC 10.67 258 4,330,622 Etiocholanolone AC 0.00 0,000 272 Androsterone AC 0.00 0.000 272 5b AndroBtan 3a 17b diol diAC 15,14 1,418 256 15,590,168 5a Androslan 3a 17b diol diAC 15.50 1.452 316 9,733,826 11 KetoEtiocholanolone AC 0-00 O.ODO 271 5b Preanan 3a 2Da diol diAC 19.12 1 791 ?84 20 380 3^8 M2 signal Name 01 sional 01 Response 01 Ratio 5a Androstanol AC 243 4,507,718 104.1 Etiocholanoione AC 257 0.0 Androsterone AC 257 0.0 5b Androstan 3a 17b diol diAC 316 14,182,571 91.0 5a Androstan 3a 17b diol diAC 241 5,804,397 59.6 1 1 KetoEtiocholanolone AC 191 0.0 5h Preanan 3a ?0a diol rilAC 269 11439 074 56.1 IW3 signal Name 07 sianal 0? Resnnnse 02 Ratio 5a Androstanol AC 204 2,391,308 55.2 Etiocholanoione AC 201 0.0 Androsterone AC 218 0.0 5b Androstan 3a 17b diol diAC 241 11,985,724 76.9 5a Androstan 3a 17b diol diAC 256 4,855,730 49.9 1 1 KetoEtiocholanolone AC 286 0.0 5b Preanan 3a ?0a diol diAC 344 5.570 119 27.3 I i Page 1 of 2 C :\M5DCHEM\CUSTRPTMVIAN52.CRT 8/4/2006 2:43 PM USADA 0321 31 D:\Msd2ZAout06\0408l1 rSD7474r3.D 5 a Androstanol AC n i : L.I ; i u (—1 Etiocholanolone AC A ^.^.J^"^-^ '-^I^-^Trfr Androsterone AC 1—1 F • Li u I-; i I''. i ' L-i i ! iJ 5b Androstan 3a 17b diol diAC 11 KetoEttochotanolone AC ''b^^i^mf^.^As 5a Androst an 3a 17 b dio l diAC -ins — .v= — =^ — ^?1S- 5b Pregnan 3a 20a diol diAC i^tr^Tif^^a;^ 5r :•=!.!-- -.y. / I / 1 / I f 1 / '■'' ^^^v / '' ' / ' -^ -~" '-— "■ '■■' "" Page 2 or 2 C;\MSDCHEMVCUSTRPT\MAN52.CRT 3/4/2006 2:43 PM USADA 0322 3i LNDD ENREGISTREMENT Codification : E-FCR-09 VciBion : A Date: 31/01/2006 1/3 FICHE D' ANALYSE / RESULTAT ANALYSE QUALITATIVE GC/MS POUR CONFIRMATION GC/OIRMS Echantilion : 178/07 B995474 Tolerances fix^es par I'AMA ( document : WADA Technical Document - TD2003IDCR ) Tolerances sur le tr et Je nr : +/-!% ou +/- 0^ min (prendre la plus faibie des deux) Pour les abondances relatives > 50% il est admis +/- 10% (en absolu ) de variation 25 ' ■ Caract^risation formelle de tous les analytes : I ■ I Paraphe et code op6rateur : oui '^ non ^^ JH Observations : Cel enregisirement est a archiver dans le dossier de confirmation de I'echantilhn u USADA 0325 2^ LNDD ENREGISTREMENT Codification ; E-CC-11 Version: B Date: 08/03/2006 1/1 VERmCATION DES PERFORMANCES INSTRUMENTALES EN CG/SM (screening et confirmation) ; I i i LI Li U n Numero d'idenfification de I'appareil : HSDiJl . Date;o'-i(o?(o6 1 - Source d'ionisation MSD Autotune: Ion 69 ou 219 majoritaire Autotune : Abondance de I'ion 502 > 3% Repel3er<35 Polaris Ion time > 2 ms Observations ; 2 - Etaacfaat^ du svst^me MSD Polaris Observations : Oui Non ^ u u 18/69 (H20), 28/69 (N2), 32/69.(02), 44/69 (C02)< 10% Air et eSu.: Intensity ion 19 < intensite ion 18 'Oui Non o/ I ; i \ 3 - Sensibility Screening Conf Recal / Mix conforme TP conforme - Fichier :d^asTt.< At oi TP confonne - Fichier : TP conforme - Fichier : TP conforme -Fichier: TP confonne - Fichier: Oui Non o^ Observations : f I ■ ( Code operateur etparaphe : SQcS^ Cet enregistnment e'st a archiver dans le classeur C-MA-Ech de I'appareil USADA 0326 3:^ L.I L:: l; n LJ n i ] r l; Lj Fri Aug 04 0Br23:16 2006 C : \MSDCHEM\1\5 9 7 3N\ATUNE . U 5973 Autotune Instrument ; MS d22 Mass 69.00 Ab 363227 Pw50 0.60 Mass Ab Pw50 219. 00 409239 . 61 Mass Ab Pw50 502. 00 57035 0. 51 YX. Ion Pol Emission ElEnrgy Filament Repeller lonFcus EntLens EntOf f s PFTBA POS 34 . 6 69 . 9 2 27 . 44 90. 2 18 .5 17 . 82 Mass Gain MassOf fs AmuGain AmuOf f s Wid219 DC Pol HEDEnab EMVolts -0 267 -10 2186 130 .037 MEG ON 1906 Samples g OPEN Averages 3 Stepsize 0.10 Zones : MS Source MS Quad 230 Foreline 150 105 66 71 216 221 300 505 Scan : 10, 00 - 700. 00 Samples : 8 Thresh: 10 Step: 0,10 115 peaks Base: 219.00 Abundance: 353984 100 -, 90 - 80 - 70 - 60 - 50 - 40 - 30 - 20 - 10 - 100 200 Mass Abund 69.00 322496 219.00 353984 502.00 53248 300 Pel Abund 100.00 109. 76 16. 51 400 Iso Mass 70. 00 220. 00 503. 00 500 600 ISO Abund Iso Ratio 3626 1.12 1526S 4.31 516e 9.70 USADA 0327 3S ' -. u 1 i S973 Air and Water Check Instrument : MSD2 2 Fri Rug 0^ 08:27:3^ 2 06 scan, ,0.00 ^ ,5.00 S.,p.„, - , .,„.,, „ 3..p. 0.10 ^ ' "° "-"-" ^^1A5^3. S 69 peaks Base: 69.00 Abundance: 339072 100 -| 95 - 90 - 85 - 80 - 75 - 70 - 65 - 60 - 55 - 50 - 45 - 40 - 35 - 30 - 25 - 20 - 15 - 10 - 5 - -- 10 20 i 30 40 50 60 70 ^Vf.^ Abund Bel Abund Iso Mass Iso Abund Iso Ratio 69.00 339072 100.00 70.00 365"= 18.10 2819 0.83 19. DO 28. 10 4239 1.25 29.00 32 101 1. 08 1. 14 2. 38 Current Pa rams used: ATUNE . U ! "1 ! f Relatiue abundances: 18/69 = 0.83 28/69 = 1 .25 32/69 = 0.43 44/69 = 0.06 28/ia = 150 . 37 Water% Nitrogen% Oxygen% Carbon Dioxide* Nitrogen/ Water% USADA 0328 33